產(chǎn)品介紹
基 因 型Agrobacterium rhizogenes(strR ) MSU440 Ri (agropine type)簡 要 說 明發(fā)根農(nóng)桿菌是根瘤菌科(Rhizobiaceae)農(nóng)桿菌屬(agrobacterium)的一種革蘭氏陰性土壤細菌,它能夠感染大多數(shù)雙子葉植物和少數(shù)單子葉植物以及個別裸子植物。 MSU440發(fā)根農(nóng)桿菌菌株含有農(nóng)桿堿型Ri質(zhì)粒,具有廣泛的宿主范圍(玉米,煙草,茶樹,青蒿等),同時具有鏈霉素抗性。本公司生產(chǎn)的 MSU440化學轉(zhuǎn)化感受態(tài)細胞經(jīng)特殊工藝制作,pCAMBIA2301質(zhì)粒(卡那霉素抗性)檢測,轉(zhuǎn)化效率>104 cfu/μg DNA。操 作 說 明1.取-80℃保存的Ar MSU440發(fā)根農(nóng)桿菌感受態(tài)于室溫或手心片刻待其部分融化,處于冰水混合狀態(tài)時插入冰中。2.每100μl感受態(tài)加入0.01-1 μg質(zhì)粒DNA(轉(zhuǎn)化效率較高,第一次使用前最好做預實驗確定所加質(zhì)粒的量),用手快速、劇烈撥打管底混勻或用槍吹吸混勻,依次放于冰中靜置5分鐘、液氮5分鐘、37℃水浴5分鐘、冰浴5分鐘。3. 冰浴中拿出放室溫,加入700μl 無抗生素的TY液體培養(yǎng)基,于28℃振蕩培養(yǎng)2小時。4. 6000 rpm 離心一分鐘收菌,留取100μl 左右上清輕輕吹打重懸菌塊涂布于含相應抗生素的TY平板上,倒置放于28℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)2-3天注 意 事 項1. 加入質(zhì)粒時體積不應大于感受態(tài)體積的1/10;質(zhì)粒不純或存在乙醇等有機物污染,轉(zhuǎn)化效率急劇下降;質(zhì)粒增大一倍,轉(zhuǎn)化效率下降一個數(shù)量級。2. 混勻質(zhì)粒時應用手指快速撥打管底或用槍吹吸混勻,務必使質(zhì)??焖?、均勻分散開,與感受態(tài)細胞充分接觸。轉(zhuǎn)化高濃度的質(zhì)??上鄳獪p少最終用于涂板的菌量。3. 平板上陽性克隆密度過大時,由于營養(yǎng)不足,陽性克隆生長變慢,菌落變小,為了獲得大的菌落,應減少質(zhì)粒用量或降低涂板的菌量。4. MSU440具有鏈霉素抗性,不可用于具有鏈霉素抗性質(zhì)粒的轉(zhuǎn)化。
此產(chǎn)品需要干冰運輸發(fā)貨,會根據(jù)路途及包裝大小收取一定的干冰運費。