產(chǎn)品介紹

基 因 型F- ompT hsdSB(rB- mB- ) gal dcm lacY1 (DE3)簡(jiǎn) 要 說(shuō) 明Tuner（DE3）菌株是BL21菌株的 lacZY基因（半乳糖苷透性酶基因）突變株，此突變導(dǎo)致IPTG以均一速度進(jìn)入體系中大腸桿菌的每個(gè)細(xì)胞，產(chǎn)生更加嚴(yán)格、均一的濃度依賴。此菌株用于高效表達(dá)克隆于含有噬菌體T7啟動(dòng)子的表達(dá)載體(如pET系列)的基因。λ噬菌體DE3區(qū)含有T7噬菌體RNA聚合酶，該區(qū)整合于Tuner的染色體上，所以稱為T(mén)uner（DE3） ，可同時(shí)表達(dá)T7 RNA聚合酶和大腸桿菌RNA聚合酶，可用于pET系列，pGEX，pMAL等質(zhì)粒的蛋白表達(dá)。High5TM系列Tuner（DE3）感受態(tài)細(xì)胞由特殊工藝制作，經(jīng)pUC19質(zhì)粒檢測(cè)轉(zhuǎn)化效率達(dá)107cfu/μg。操 作 說(shuō) 明1.取100μl冰上融化的Tuner（DE3）感受態(tài)細(xì)胞，加入目的質(zhì)粒并輕輕混勻，冰上靜置25分鐘。2.42℃水浴熱激45秒，迅速放回冰上并靜置2分鐘，晃動(dòng)會(huì)降低轉(zhuǎn)化效率。3.向離心管中加入700μl不含抗生素的無(wú)菌培養(yǎng)基（2YT或LB），混勻后37℃，200rpm復(fù)蘇60分鐘。4.5000rpm離心一分鐘收菌，留取100μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應(yīng)抗生素的2YT或LB培養(yǎng)基上。5.將平板倒置放于37℃培養(yǎng)箱過(guò)夜培養(yǎng)。注 意 事 項(xiàng)1.感受態(tài)細(xì)胞最好在冰上融化。2.混入質(zhì)粒時(shí)應(yīng)輕柔操作3.轉(zhuǎn)化高濃度的質(zhì)?？上鄳?yīng)減少最終用于涂板的菌量。4.誘導(dǎo)時(shí)，IPTG濃度可選（0.1-40mM均可）。5.為獲得需要量的蛋白，最佳誘導(dǎo)時(shí)間，溫度，IPTG濃度需實(shí)驗(yàn)者優(yōu)化。

此產(chǎn)品需要干冰運(yùn)輸發(fā)貨，會(huì)根據(jù)路途及包裝大小收取一定的干冰運(yùn)費(fèi)。