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基 因 型F- mcrB mrr hsdS20(rB- mB-) recA13 leuB6 ara-14 proA2 lacY1 galK2 xyl-5 mtl-1 rpsL20(strR) glnV44λ-簡 要 說 明HB101菌株是 E. Coli K12菌株和 E. Coli B 菌株的雜合產物（同時也是Stbl3的原始菌株）。recA13突變可有效抑制長片段末端重復區(qū)的重組，降低錯誤重組的概率；但不含核酸酶endA1突變，體內核酸酶含量較高，提取質粒時務必使用質粒提取試劑盒中去蛋白液。hsdS20背景使HB101缺失內切酶系統(tǒng)，增強了外源DNA的穩(wěn)定性和提取質量；此菌株具有鏈霉素抗性；不存在lacIqZΔM15，不可用于藍、白斑篩選。High5TM系列HB101感受態(tài)細胞經特殊工藝制作，經pUC19質粒檢測轉化效率>5×108cfu/μg。操 作 說 明1.HB101感受態(tài)細胞放手心或室溫片刻，待菌體處于冰水混合狀態(tài)時迅速插入冰中，加入目的DNA（質?；蜻B接產物）并用手撥打EP管底輕輕混勻，冰上靜置25分鐘。2.42℃水浴熱激45秒，迅速放回冰上并靜置2分鐘，晃動會降低轉化效率。3.向離心管中加入700μl不含抗生素的無菌培養(yǎng)基（2YT或LB），混勻后37℃，200rpm復蘇60分鐘。4.5000rpm離心一分鐘收菌，留取100μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應抗生素的2YT或LB培養(yǎng)基上。5.將平板倒置放于37℃培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)。注 意 事 項1.感受態(tài)細胞處于冰水混合狀態(tài)時立即插入冰上。2.混入質粒或連接產物時應輕柔操作。3.轉化高濃度的質?；蚋咝实倪B接產物可相應減少最終用于涂板的菌量。操作過程中勿將感受態(tài)暴露于氧化性環(huán)境中，例如超凈臺應將臭氧排凈后再使用。

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