產品介紹
Fluo-3 AM是一種常用的檢測細胞內鈣離子濃度的熒光探針。 Fluo-3 AM是一種可以穿透細胞膜的熒光染料。Fluo-3 AM進入細胞后可以被細胞內的酯酶剪切形成Fluo-3,從而被滯留在細胞內。Fluo-3游離配體幾乎是非熒光性的,其熒光不會隨鈣離子濃度升高而增強。Fluo-3可以和鈣離子結合,結合鈣離子后可以產生較強的熒光,最大激發(fā)波長為506 nm,最大發(fā)射波長為526 nm。實際檢測時推薦使用的激發(fā)波長為488 nm左右,發(fā)射波長為525-530 nm??梢允褂眉す夤簿劢癸@微鏡或流式細胞儀檢測細胞內鈣離子濃度的變化。
本Fluo-3 AM(鈣離子熒光探針)可以用無水DMSO(anhydrous DMSO)配制5mM的儲存液。 用于細胞內鈣離子檢測時,Fluo-3 AM的常用濃度為0.5-5 μM。通常用含有0.5-5μM的Fluo-3 AM的適當溶液和細胞一起在20-37℃孵育15-60分鐘進行熒光探針裝載,隨后適當洗滌,洗滌后可以考慮適當再孵育20-30分鐘以確保Fluo-3 AM在細胞內完全轉變成Fluo-3。
注意事項
本Fluo-3 AM在4℃、冰浴等較低溫度情況下會凝固而粘在離心管管底、管壁或管蓋內,可以20-25℃水浴溫育片刻至全部融解后使用。
熒光染料均存在淬滅問題,請盡量注意避光,以減緩熒光淬滅。
為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。